多浪绵羊骨骼肌卫星细胞的分离培养、鉴定及成肌诱导分化

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第11期北京时间：

作者：赵谦, 张萍, 李向臣, 关伟军, 浦亚斌, 赵倩君, 马月辉

单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

摘要：为了在体外细胞水平模拟多浪绵羊肌肉生长发育过程，本研究以多浪绵羊为试验动物，采用胶原酶和胰酶两步酶消化法分离多浪绵羊骨骼肌卫星细胞（satellite cells，SCs），并利用差速贴壁的方法纯化分离得到的SCs。利用免疫荧光技术检测SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的表达情况，鉴定分离得到的SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs向成肌方向分化。通过显微镜观察和成肌分化标记基因肌球蛋白重链（myosin heavy chain，MHC）的免疫荧光，检测肌管的形成情况。通过对SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的免疫荧光鉴定，确认本研究成功分离得到多浪绵羊SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs成肌分化，显微镜观察和MHC免疫荧光可以明显观察和检测到肌管的形成。本研究对多浪绵羊SCs成功地进行了分离和鉴定，并建立了体外培养条件下多浪绵羊SCs的成肌诱导分化。

关键词：绵羊;骨骼肌卫星细胞;分离培养;成肌分化

基金资助：国家自然科学基金项目（31201765）；国家科技基础条件平台家养动物种质资源共享平台