猫重组变应原Fel d 1与乙肝病毒核心抗原融合基因的原核表达

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第11期北京时间：

作者：裴业春, 安晓荣, 侯健, 陈永福, 闫凤祥, 关宏, 韦双双, 王大勇

单位：1. 海南大学农学院, 生物技术与分子药理学实验室, 海口 570228;2. 中国农业大学生物学院, 农业生物技术国家重点实验室, 北京 100193

摘要：为将猫重组变应原Fel d 1蛋白展示在乙肝病毒核心抗原（HBcAg）病毒样颗粒的表面，本试验将编码Fel d 1蛋白的两个基因chain 1和chain 2拼接在一起形成重组Fel d 1（rFel d 1），然后插入到HBcAg的c/e1 loop区，取代HBcAg c/e1 loop区的D78与E83之间的氨基酸。经密码子优化后进行全基因合成，成功构建了pET28a-HBcAg-rFel d 1原核表达载体，将其转化入大肠杆菌BL21（DE3）中，进行原核诱导表达与Ni-NTA亲和层析纯化，并进行SDS-PAGE电泳、Western blotting和透射电镜检测。结果显示，本试验成功表达了HBcAg-rFel d 1融合蛋白，并利用镍柱纯化得到了较纯的HBcAg-rFel d 1融合蛋白，进一步利用负染法透射电子显微镜检测到HBcAg-rFel d 1融合蛋白呈现病毒样颗粒结构。HBcAg-rFel d 1融合蛋白能自发形成病毒样颗粒结构，为猫过敏症的预防与治疗性疫苗的开发奠定基础。

关键词：猫变应原;乙肝病毒核心抗原;Feld1;病毒样颗粒

基金资助：国家自然科学基金青年项目（31402257）；海南省自然科学基金项目（20153084）