进出口动物中新霉素ELISA检测方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第12期北京时间：

作者：孙明君, 邱芳, 张金玲, 郑小龙

单位：1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心, 青岛 266002;2. 潍坊出入境检验检疫局, 潍坊 261000

摘要：应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素，通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数，以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线，建立了进出口食用动物中新霉素ELISA快速检测技术，并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明，建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1：200，抗体的最佳稀释度为1：2 000，半数抑制浓度（IC50）为6.99 ng/mL；该方法的最低检测限达40 ng/mL，与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%，平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.5~40 ng/mL范围内是线性的，相关系数为0.987，标准曲线方程为y=-37.66x+94.592；与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA检测方法。

关键词：进出口食用动物;新霉素;酶联免疫吸附试验;检测方法

基金资助：CNCA检验检疫行业标准制定计划项目（2014B369）