Wip1过表达转基因小鼠模型的制备与鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2016年第12期北京时间：

作者：高倩, 胡言青, 唐懿挺, 牟玉莲

单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193

摘要：本研究旨在构建Wip1过表达转基因小鼠，并对Wip1过表达转基因小鼠进行RNA水平上的筛选，为研究动脉粥样硬化的发生机制提供一种动物模型。通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）获得小鼠组织的cDNA，并以其为模板进行PCR扩增，对扩增片段进行胶回收，然后进行扩增片段和空载体的双酶切，将酶切后胶回收得到的Wip1基因全长与载体pcDNA3.1（+）进行连接，获得Wip1-pcDNA3.1（+）过表达载体，最终得到Wip1过表达转基因原代小鼠，并利用Southern blotting方法和实时荧光定量PCR方法对小鼠进行鉴定筛选。试验获得Wip1过表达转基因原代小鼠30只，利用Southern blotting方法鉴定出阳性小鼠11只，阳性率为36.67%，实时荧光定量PCR筛选Wip1过表达转基因小鼠阳性率为32.84%。以上结果表明，试验成功构建了Wip1-pcDNA3.1（+）过表达载体，并且经过Wip1基因在小鼠组织DNA和RNA水平上的鉴定筛选，成功获得了Wip1过表达转基因小鼠。

关键词：Wip1;过表达;小鼠模型

基金资助：国家自然科学基金（31572378）