恩拉霉素生物检测方法的改进

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第2期北京时间：

作者：许铭玉, 宋淑婷, 张莹, 张会图

单位：天津科技大学生物工程学院, 应用微生物与酶工程实验室, 天津 300457

摘要：试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进，以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定；并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响，建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明，利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56，用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品，浸提时间3.5 h，可以充分浸提供试品中的恩拉霉素；使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×107个/mL的平皿，形成的抑菌圈边缘规则清晰，准确度好；使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用，且操作简单、重复性好，可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内，其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性，所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344，相关系数R=0.9962，最终有效区间是0.75~2.5 U，测得的结果更接近真实值，可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法，值得推广和使用。

关键词：恩拉霉素;生物检测法;干燥滤纸片法;管碟法

基金资助：Ficellomycin的生物合成及组合生物合成研究（81373309）