绵羊肺炎支原体p60蛋白N端与C端的表达及其免疫学特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第2期北京时间：

作者：麻昌姣, 郑佳琪, 黄海碧, 王晓晖, 白帆, 郝永清

单位：内蒙古农业大学兽医学院微生物与免疫实验室, 呼和浩特 010018

摘要：为分析绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae，MO）膜表面脂蛋白p60的免疫学特性，本研究分别扩增p60蛋白N端与C端的基因，并通过重叠延伸PCR将C端基因序列中的TGA（1 459－1 461 bp）定点突变为同义密码子TGG。将扩增的基因片段分别插入到pET-32a（+）表达载体上，重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中进行诱导表达，得到分子质量约57 ku的p60-N蛋白和分子质量约为30.5 ku的p60-C蛋白；再对纯化后的重组蛋白进行 Western blotting 分析，结果表明重组蛋白均可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应，表明表达的重组蛋白p60-N和p60-C均有良好的反应原性。本研究为筛选MO主要的免疫原性蛋白和建立特异的血清学诊断方法提供了依据。

关键词：绵羊肺炎支原体;p60蛋白;表达

基金资助：内蒙古自治区科技计划"舍饲肉羊疫病动态防控关键技术研究"（201502070）；国家科技支撑计划"重点牧区"生产生态生活"保障技术集成与示范"（2012BAD13B00）