猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第2期北京时间：

作者：罗亚坤, 梁琳, 王静, 刘存, 刘琪, 刘畅, 蔺文成, 崔尚金

单位：1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;2. 农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站, 北京 100193;3. 华南农业大学动物科学学院, 广州 510642

摘要：试验旨在建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）的环介导等温扩增方法（LAMP），为诊断PEDV提供简便、敏感、准确可靠的工具。参考GenBank中PEDV基因序列（登录号：KT799997），针对PEDVN基因设计了6条引物，对所建立的LAMP反应体系、反应温度进行优化，建立可特异性扩增PEDV的LAMP方法。结果显示，本试验成功建立了PEDV LAMP检测方法，在60℃恒温下反应60 min，能特异性地检测PEDV，检测限量为91拷贝/μL，比常规PCR方法的敏感性高100倍。对比75份临床样本的LAMP和常规RT-PCR法检测结果，显示两种方法符合率为97.3%。综上所述，本试验建立的LAMP方法具有特异性强、敏感性高，操作简单，设备要求低的特点，适用于PEDV临床样本的快速检测。

关键词：猪流行性腹泻病毒;环介导等温扩增技术;检测

基金资助：中国农业科学院创新工程项目（ASTIP-IAS16）