ST细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第3期北京时间：

作者：王鑫, 石达, 董慧, 曹丽艳, 陈建飞, 时洪艳, 张鑫, 冯力

单位：1. 东北农业大学生命科学学院, 哈尔滨 150030;2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室, 哈尔滨 150001

摘要：为了筛选与猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）结构蛋白VP2相互作用的宿主蛋白，深入研究病毒入侵及致病的分子机制，本试验建立了ST细胞酵母双杂交cDNA文库。采用RNeasy Min Kit提取ST细胞的总RNA，反转录合成cDNA第一链之后，通过SMART技术合成了双链cDNA，并利用同源重组的方法，构建了ST细胞的酵母cDNA文库。结果显示，文库滴度为8.1×108 CFU/mL，插入的双链cDNA片段大小为250~1 000 bp，平均大小约为500 bp，文库的重组率为96%。此文库可用于筛选与病毒相互作用的ST细胞宿主蛋白，为进一步阐明病毒的致病机制奠定了基础。

关键词：猪细小病毒;酵母双杂交;ST细胞;cDNA文库

基金资助：黑龙江省科研机构创新能力提升专项（YC2015D011）；"十二五"农村领域国家科技计划课题（2015BAD12B02）