樱桃谷鸭源鹅出血性多瘤病毒VP3基因的克隆与序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第4期北京时间：

作者：万春和, 刘荣昌, 程龙飞, 傅光华, 傅秋玲, 施少华, 陈红梅, 黄瑜

单位：福建省农业科学院畜牧兽医研究所, 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心, 福建省禽病防治重点实验室, 福州 350013

摘要：为明确福建地区是否存在鹅出血性多瘤病毒（goose hemorrhagic polyomavirus，GHPV）感染，本研究对2016年福建省临床送检测19份鸭组织样品进行GHPV检测，结果从1例樱桃谷鸭中检测到GHPV感染阳性（记为GHPV-FJ201601株）。随后根据GenBank中GHPV参考株序列特征，设计针对GHPV的VP3基因特异性引物，利用PCR技术扩增获得GHPV的VP3基因片段。结果显示，GHPV-FJ201601株的VP3基因全长为654 bp，编码217个氨基酸。对编码的VP3蛋白分析发现其理论等电点为9.37，带负电荷氨基酸为23个（Asp+Glu），带正电荷氨基酸为28个（Arg+Lys）；不稳定指数为38.43，是一个稳定蛋白；脂肪系数64.33，总平均疏水性指数为－0.744；该蛋白无典型的信号肽切割位点；其亚细胞定位类型为核定位；对其进行磷酸化分析发现，该蛋白存在14个氨基酸磷酸化位点。核苷酸同源性分析显示，不同来源GHPV代表株VP3基因相互之间核苷酸同源性均较高，均不低于99.7%。VP3基因遗传进化结果显示，GHPV-FJ201601株和鹅源GHPV分离株（匈牙利14234株与法国Toulouse Goose 2000株）处于同一遗传进化分支，与鸭源分离株（法国Toulouse Muscovy Duck 2008株、法国Toulouse Mule Duck 2008和中国106株）却处于不同的遗传进化分支，但所有GHPV分离株VP3基因遗传进化均较近。本研究首次证实福建地区樱桃谷鸭群中存在GHPV感染，为丰富不同地区与宿主的GHPV分子流行病学数据提供参考。

关键词：鹅出血性多瘤病毒;樱桃谷鸭;VP3基因')">VP3基因;克隆;序列分析

基金资助：国家水禽产业技术体系（CARS-43）；国家自然科学基金（31602068）；福建省畜禽疫病防控技术重大研发平台（2014N2003）；福建省农业科学院畜牧兽医研究所基金（MYQJ2015（S）-3）；福建省属公益类项目（2015R1023-7）；福建省自然科学基金（2015J01114）