鸡细小病毒半巢式PCR检测方法的建立及初步应用

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第5期北京时间：

作者：奉彬, 谢芝勋, 张艳芳, 黄娇玲, 王盛, 范晴, 黄莉, 谢丽基, 曾婷婷, 罗思思, 邓显文, 谢志勤, 刘加波, 宋中宝, 林二克

单位：1. 广西壮族自治区兽医研究所, 广西兽医生物技术重点实验室, 南宁 530001;2. 南宁市良凤农牧有限责任公司, 南宁 530031

摘要：为建立一种快速、特异、灵敏的检测鸡细小病毒（chicken parvovirus，ChPV）的方法，根据ChPV的保守基因NS1设计了3条特异性引物，建立并优化了能快速检测ChPV的半巢式PCR方法，对其进行特异性和敏感性试验，并用所建立的方法对48份临床样品进行了检测。特异性和敏感性试验结果显示，建立的半巢式PCR只对ChPV敏感，扩增产物为186 bp的特异性条带；其最低能检测到5.62 fg/μL的ChPV DNA；而对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒不敏感。临床检测结果显示，同时对48份临床样品进行检测，检出率为16.67%（8/48），提示广西区内鸡群存在ChPV感染。本研究建立的ChPV半巢式PCR方法适用于ChPV的临床检测。

关键词：鸡细小病毒;半巢式PCR;检测

基金资助：广西科技项目（15-140-31-A-1、15-140-31-B-1、桂科AB16380003）；南宁市科技攻关项目（20152308）；国家“万人计划”领军人才专项（2016-37-88）