塔里木马鹿鹿茸VEGF基因克隆及其在不同鹿茸组织中的表达研究

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第5期北京时间：

作者：刘俊峰, 王晓婷, 钟婷, 郭雪峰

单位：1. 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室, 阿拉尔 843300;2. 塔里木大学动物科学学院, 阿拉尔 843300

摘要：试验旨在从塔里木马鹿鹿茸顶端组织中克隆血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的编码序列，分析其分子特性及其在鹿茸组织中的表达情况。本研究采用改良的Trizol法提取鹿茸顶端组织总RNA，以RT-PCR方法获得VEGF基因，回收纯化后连接到pMD18-T载体，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞并鉴定，利用免疫组化法确定VEGF蛋白在塔里木马鹿鹿茸顶端组织茸皮层、间充质层和软骨层中的表达水平。结果显示，VEGF基因开放读码框（ORF）全长为648 bp，编码216个氨基酸。通过其序列比对和进化分析发现，塔里木马鹿茸中VEGF与人、牛、羊、猪的VEGF核苷酸序列同源性分别为98.75%、96.55%、97.58%和97.56%，其中与人VEGF同源性较高。免疫组化试验表明，塔里木马鹿VEGF蛋白在间充质、茸皮层和软骨中均有表达，但无明显表达差异。说明塔里木马鹿鹿茸可能会是人类研究再生医学和血管相关疾病的理想模型，同时，本研究为不同发育期塔里木马鹿鹿茸再生干细胞比较蛋白质组学研究提供了基础试验数据。

关键词：塔里木马鹿茸;血管内皮生长因子;克隆;免疫组化

基金资助：兵团塔里木畜牧科技重点实验室项目（HS201509）