猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2抗原表位区的原核表达及免疫原性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第6期北京时间：

作者：胡荣, 白伟杰, 王治家, 孙普, 卢曾军, 李冬, 刘在新

单位：中国农业科学院兰州兽医研究所, 家畜疫病病原生物学国家重点实验室, 兰州 730046

摘要：试验旨在表达纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2重组蛋白。利用PCR技术扩增获得大小为750 bp的NSP2 226－475位氨基酸编码序列，然后将该序列亚克隆到pET-28a（+）表达载体上，通过pET-28a（+）表达载体在大肠杆菌Rosetta-gami 2（DE3）pLys中得以表达，获得大小为29 ku的重组蛋白，对重组蛋白诱导时间进行优化，SDS-PAGE显示重组蛋白在37 ℃经1 mmol/L IPTG诱导8 h时表达量最大，免疫印迹结果证实表达的蛋白能被PRRSV阳性血清识别，具有良好的免疫原性。本研究成功表达纯化了NSP2重组蛋白，为目标蛋白作为包被抗原建立检测PRRSV血清抗体的ELISA方法奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征;NSP2;免疫原性

基金资助：中国农业科学院创新工程