猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第6期北京时间：

作者：陈希文, 汪谦, 尹苗, 李莲, 罗文涛, 杨凤, 郭爱伟, 周杰珑, 王雄清

单位：1. 绵阳师范学院动物应用技术研究所, 绵阳 621000;2. 四川铁骑力士集团冯光德实验室, 绵阳 621006;3. 西南林业大学生命科学学院, 昆明 650224

摘要：为建立一种快速、灵敏、简便的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）早期检测方法，本研究利用逆转录环介导恒温扩增技术（RT-LAMP），针对PRRSV的ORF5基因片段设计了4条引物，利用Bst DNA聚合酶在65 ℃恒温条件下进行逆转录扩增，通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和加入SYBR Green Ⅰ染料肉眼判断结果，建立了PRRSV RT-LAMP检测方法。结果表明，该检测方法具有良好的特异性，与其他常见病毒如猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒等无交叉反应，较普通RT-PCR灵敏性高100倍。采用RT-LAMP和RT-PCR分别对10份临床样本同时进行检测，符合率为100%。因此，本研究建立的RT-LAMP是一种可适用于临床PRRSV检测的快速、简单、灵敏、特异的检测方法。

关键词：逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）;猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）;快速检测

基金资助：四川省科技厅项目（2013JY0127）；四川省重点实验室项目（ESP1505）；四川省教育厅项目（16ZA0321）