鸡β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性测定

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第7期北京时间：

作者：刘新文, 王秀丽, 郭东春, 郭伟伟, 邹敏, 范根成

单位：1. 青岛易邦生物工程有限公司, 青岛 266032;2. 哈尔滨兽医研究所, 哈尔滨 150069

摘要：为研究鸡β干扰素（chicken interferon-β，ChIFNβ）蛋白在毕赤酵母中的表达及其抗病毒活性，将克隆的ChIFNβ基因亚克隆至酵母表达载体pPICZα-A中，构建重组质粒pPIC-ChIFNβ。将鉴定正确的质粒pPIC-ChIFNβ线性化，通过电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中，得到阳性菌株。经1.0%甲醇连续诱导4 d，表达产物利用SDS-PAGE电泳、细胞病变抑制法等进行分析。ChIFNβ在酵母中获得了分泌型表达，表达产物分子质量约为17 ku。表达产物以细胞病变抑制法检测其活性，效价为107.5 U/mL；在鸡胚中能有效抑制禽流感病毒H9N2的增殖。动物攻毒保护试验结果显示，表达的蛋白可提供70%的免疫保护。表达的ChIFNβ蛋白具有较好的抗病毒活性，本研究可为ChIFNβ的应用提供重要参考。

关键词：鸡β干扰素;分泌表达;抗病毒活性