苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第7期北京时间：

作者：贾琦珍, 陈根元, 王连群, 亚森·麦麦提, 王帅

单位：塔里木大学动物科学学院, 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室, 阿拉尔 843300

摘要：本试验采用苦马豆素（swainsonine，SW）人工抗原SW-OVA免疫接种BALB/c小鼠，通过杂交瘤技术建立了1株能稳定分泌SW单克隆抗体的杂交瘤细胞1F10，杂交瘤细胞染色体数目为45~50对。经间接ELISA检测，该株细胞培养上清中抗体效价为1：25 600，诱生腹水效价为1：80 000。单克隆抗体的亚型为IgG1，亲和力解离常数为1.14×1010，腹水抗体纯化后纯度可达98%，回收率80%，SDS-PAGE凝胶电泳可见单克隆抗体的轻链、重链分子质量分别为25和50 ku，Western blotting检测抗体能特异性的识别SW。其线性检测范围为4~128 μg/mL（R2=0.9969），与BSA、明胶、多聚赖氨酸、α-甘露糖苷等无交叉反应。本试验制备的SW单克隆抗体为免疫学检测SW和免疫学防制家畜疯草中毒奠定基础。

关键词：苦马豆素;单克隆抗体;杂交瘤细胞;间接ElISA

基金资助：国家自然科学基金（31460678）；国家星火计划项目（2015GA891015）；兵团塔里木畜牧科技重点实验室开放课题（HS201207）