猪伪狂犬病病毒变异毒株HeNZK-2014的分离鉴定及gE基因序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第7期北京时间：

作者：马震原, 李宁, 闫若潜, 班付国, 王淑娟, 赵雪丽, 谢彩华, 王东方, 王华俊, 曹伟伟

单位：1. 河南省动物疫病预防与控制中心, 郑州 450008;2. 广东永顺生物制药股份有限公司, 广州 510000

摘要：为了解猪伪狂犬病病毒（PRV）变异毒株的特点，本研究采集临床疑似PRV感染发病猪的淋巴结等组织样品进行PCR鉴定，选取仅PRV阳性的组织样品经研磨除菌后取上清接种于PK-15细胞进行病毒分离培养、蚀斑纯化、PCR和间接免疫荧光法（IFA）鉴定，采用Reed-Muench法测定PRV的TCID50，接种小鼠并观察临床症状，对纯化的PRV和死亡小鼠脑组织样品进行gE基因PCR扩增及测序分析。结果显示，PRV阳性病料接种于PK-15细胞24 h后出现典型细胞病变（CPE），经3轮蚀斑纯化后PCR和IFA鉴定结果均为阳性，分离株命名为HeNZK-2014，其TCID50为10-9.77/0.1 mL；以1×108个TCID50病毒悬液接种小鼠22 h后可引起小鼠出现奇痒、撕咬、死亡等典型猪伪狂犬病症状，死亡小鼠脑组织样品PRV PCR检测结果为阳性；纯化病毒和死亡小鼠脑组织样品gE基因核苷酸序列同源性为100.0%，与GenBank中2011年以前登录的经典毒株位于不同分支，与2011年之后中国流行毒株位于同一分支，在第48和496位各有1个天冬氨酸（D）的插入，具有变异毒株的典型特征。本研究成功分离了1株PRV变异毒株，为进一步开展针对PRV变异毒株的疫苗及其防控研究奠定了基础。

关键词：猪;伪狂犬病病毒;变异毒株;分离;鉴定;gE基因')">gE基因;遗传变异分析

基金资助：河南省科技创新人才计划项目（174200510003）