孕鼠暴露双酚A对仔鼠存活率、生殖激素及相关基因的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第7期北京时间：

作者：马双, 宋鹏琰, 翟福展, 钟秀会

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071001;2. 河北农业大学中兽医学院, 保定 071001

摘要：为了研究孕鼠在孕期暴露双酚A（bisphenol A，BPA）对仔鼠生殖激素及相关基因的影响，试验将40只昆明孕鼠随机分为A、B、C、D共4组，每组10只。其中A组为对照组，饲喂普通鼠粮；B、C、D组孕鼠整个妊娠期（妊娠1 d至分娩）分别按每只鼠每天50、500、2 500 mg/kg体重给予BPA，待孕鼠自然分娩，观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠性成熟（56日龄）剖杀仔鼠，摘取睾丸或卵巢称重并计算脏器指数，HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化，ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮（T）、促卵泡素（FSH）及雌二醇（E2）水平，免疫组织化学方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax、Bcl-2蛋白的表达，实时荧光定量PCR检测仔鼠睾丸StAR、CYP11a或卵巢AMH、Kitlg mRNA表达。结果显示，孕鼠暴露BPA极显著增加了仔鼠死亡率（P<0.01），显著降低了仔鼠睾丸重（P<0.05）。ELISA检测结果表明，孕鼠暴露BPA极显著降低了仔鼠T（♂）及FSH（♀）含量（P<0.01），极显著升高了仔鼠（♀） E2水平（P<0.01）。HE染色结果显示，随BPA剂量增加，仔鼠睾丸组织损伤严重，间质细胞减少；卵巢组织结构随BPA剂量增大，空泡逐渐增多，黄体颗粒数量逐渐减少。免疫组化结果显示，孕鼠暴露BPA增加了仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达，减少了Bcl-2阳性蛋白表达，显著降低了雄性仔鼠StAR mRNA表达量（P<0.05）；B、D组雄性仔鼠CYP11a mRNA表达量极显著降低（P<0.01），而C组CYP11a mRNA表达量极显著升高（P<0.01）；C、D组雌鼠Kitlg mRNA表达极显著降低（P<0.01），AMH mRNA表达量显著升高（P<0.05）。本试验结果表明，孕鼠妊娠期暴露不同剂量BPA增加了仔鼠死亡率，扰乱了生殖激素平衡和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白及生殖基因表达。

关键词：双酚A;小鼠;生殖激素;免疫组织化学;生殖基因

基金资助：国家科技部十二五科技支撑计划课题"防治家畜胎产病和提高畜禽免疫力中兽药创制及应用示范"（2011BAD34B02）