猪圆环病毒2型ORF2基因重组植物乳杆菌的构建及其免疫原性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第8期北京时间：

作者：倪能能, 王新珂, 赖强, 焦茂兴, 黄毓茂

单位：1. 华南农业大学兽医学院, 广东省动物源性人畜共患病预防与控制重点实验室, 国家生猪种业科学技术研究中心, 广州 510642;2. 宜春学院, 宜春 336000

摘要：为研制一种能有效控制猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2，PCV2）的新型疫苗，本试验将PCV2的ORF2基因克隆至植物乳杆菌表达载体pSCPSP超强启动子SCP的下游，构建重组表达质粒pSCPSP-Cap，用电击转化法转化克隆至表达宿主菌植物乳杆菌，获得一株重组植物乳杆菌。以SDS-PAGE和Western blotting法检测24 h上清液中表达的蛋白；将8周龄的SPF级BALB/c小鼠随机分组，每组8只，分别设置对照组、空载体组、灌胃组、饮水组、灭活疫苗组，试验14、28、42和56 d后对小鼠采血，分离血清，利用PCV2 ELISA抗体检测试剂盒检测小鼠血清中PCV2的抗体水平。SDS-PAGE、Western blotting结果显示，PCV2衣壳蛋白在植物乳杆菌中成功分泌表达，表达的蛋白分子质量为28 ku，且具有良好的反应原性，重组植物乳杆菌免疫小鼠诱导机体产生PCV2特异性抗体显著高于其他组（P<0.05）。结果表明，PCV2的ORF2基因在植物乳杆菌中成功表达，且具有良好的生物活性，可为PCV2口服疫苗的开发研究提供理论参考。

关键词：猪圆环病毒2型;Cap蛋白;植物乳杆菌;表达;口服疫苗

基金资助：广东省省级科技计划项目（2013B020202002）