东北黑熊源粪肠球菌EfaA基因的克隆表达及生物信息学分析

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第8期北京时间：

作者：秦晓东, 楚熹橦, 鲁承, 孙福亮, 孙兴忠

单位：1. 延边大学农学院, 延吉 133000;2. 敦化市动物检疫站, 敦化 133700;3. 白城市动物疫病预防控制中心, 白城 137000

摘要：为检测熊源粪肠球菌心内膜炎抗原（EfaA）基因，用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例，本试验根据GenBank登录的粪肠球菌EfaA基因序列（登录号：U03756.1）合成了1对PCR引物，通过PCR法扩增合成长度为689 bp的目的片段。将PCR产物克隆于pMD19-T载体，之后将其转入大肠杆菌DH5α感受态细胞筛选阳性克隆。提取扩增后的重组质粒pMD19-T-EfaA并进行PCR、酶切鉴定、序列测定及蛋白质结构预测。结果显示，本试验成功克隆出熊源粪肠球菌EfaA基因，与GenBank登录的ATCC 29212菌株同源性为100.0%。本试验成功构建了重组克隆载体pMD19-T-EfaA，并对测序结果进行了蛋白质结构的预测，为进一步建立黑熊粪肠球菌病的诊断方法提供了理论依据，同时也为黑熊疾病的防制奠定了基础。

关键词：东北黑熊;粪肠球菌心内膜炎抗原(EfaA);基因克隆;生物信息学分析

基金资助：延边大学青年基金项目（602016032）