实时荧光定量PCR研究蛋鸡组织基因表达的内参基因筛选

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第8期北京时间：

作者：张蓉, 施晓丽, 陈朝桂, 文光林, 赵忠海

单位：1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室, 贵阳 550025

摘要：为筛选出蛋鸡不同组织中稳定表达的内参基因，试验以120日龄的海兰灰蛋鸡（Gallus domesticus）为试验动物，选取常见内参基因RPS2、β-actin、GAPDH和HMBS作为候选基因，利用实时荧光定量PCR技术Ct值分析法对4个候选内参基因的相对表达进行测定，利用独立评价软件geNorm和NormFinder对蛋鸡的4个候选内参基因在不同组织（心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肠、胫骨、胰脏和子宫）中的表达稳定性进行评价。结果显示，Ct值分析和geNorm程序分析均得出相似的结果，即RPS2基因始终占主导地位，稳定性最强，β-actin基因次之；NormFinder软件分析显示，HMBS基因稳定性最好，最佳组合为HMBS和RPS2基因；当分析不同组织中表达恒定的内参基因时，发现不同组织最稳定的内参基因也不完全相同。由此说明，不同的组织器官和不同的分析方法得出的结论虽然不完全一致，但它们却有着一定的潜在共性，发展趋势有一定相似性，即RPS2和β-actin基因相对稳定性更强。

关键词：蛋鸡;内参基因;稳定性评价;geNorm软件;NormFinder软件

基金资助：国家自然科学基金（31560642）