猪白细胞介素18基因的克隆及真核表达重组质粒的构建

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第9期北京时间：

作者：石昂, 时庆贺, 李新果, 王玉国, 杨利, 李双双, 陈陆, 王川庆

单位：河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002

摘要：为获得表达猪白细胞介素18（interleukin-18，IL-18）的真核表达重组质粒，试验通过RT-PCR从猪脾脏、肺脏和淋巴结组织中扩增猪IL-18全基因并定向克隆到真核表达载体pZJ-1，测序分析和酶切鉴定正确后，转染至293T细胞中，并通过RT-PCR和Western blotting分别在基因和蛋白水平检测IL-18的表达。结果表明，试验成功构建了真核表达重组质粒pZJ-IL-18，且可以在293T细胞中表达IL-18基因。Western blotting试验证实，猪IL-18多克隆抗体能与约17 ku的表达产物发生特异性反应，表明IL-18能正确表达且具有反应原性。本试验构建了表达猪IL-18基因的真核表达质粒，并在293T细胞中瞬时表达，为进一步研究IL-18的功能奠定基础。

关键词：猪;IL-18基因;真核表达载体;克隆

基金资助：国家自然科学基金（31272567、31772781）；河南省高校科技创新人才支持计划（14HASTIT022）