雌二醇单克隆抗体制备及间接竞争ELISA检测方法的建立

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第10期北京时间：

作者：白宇, 胡景炎, 许永鹏, 何杰, 金俊杰, 李培德, 刘素贞

单位：1. 温州市农业科学研究院动物科学研究所, 温州 325006;2. 温州科技职业学院动物科学学院, 温州 325006

摘要：为建立敏感、特异、快速的雌二醇（estradiol，E2）残留免疫检测方法，本研究利用雌二醇人工抗原（E2-BSA）免疫BALB/c小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术制备特异性雌二醇单克隆抗体，利用高效价、高特异性单克隆抗体建立间接竞争ELISA（icELISA）方法。结果显示，试验成功筛选获得一株稳定分泌抗雌二醇抗体的杂交瘤细胞株（3H3），抗体效价可达1∶320 000，利用3H3腹水抗体优化间接竞争icELISA反应条件，检测抗体的敏感度，IC50为1.636 ng/mL，IC20~IC80线性范围为0.202~13.281 ng/mL。雌二醇腹水抗体与雌三醇、乙炔雌二醇的交叉反应率分别达0.31%和0.25%，而与雌酮、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、炔雌醚、己烯雌酚、壬基酚的交叉反应率均<0.1%。结果表明，利用本研究制备的单克隆抗体建立雌二醇间接竞争ELISA检测方法，可满足食品中雌二醇残留高灵敏度的检测要求。

关键词：雌二醇;单克隆抗体;间接竞争ELISA

基金资助：浙江省公益性技术研究农业项目（2014C32046）；温州市公益性社会发展科技项目（S20150026）