抑制UCHL1对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2017年第12期北京时间：

作者：史文姝, 金一

单位：延边大学, 动物遗传育种与繁殖实验室, 延吉 133002

摘要：试验旨在研究抑制泛素羧基末端水解酶-1（UCHL1）对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响。利用DAPI染色、Hoechst染色及SDS-PAGE等方法检测猪卵母细胞体外成熟率、透明带泛素化水平及多精入卵等情况。结果表明，添加不同浓度UCHL1抑制剂（10、20、25、30 μmol/L，二甲基亚砜（DMSO）及对照组）体外培养猪卵母细胞46 h后，对照组成熟率为86.22%，而30 μmol/L UCHL1抑制剂组的成熟率为15.30%，且各处理组间成熟率差异显著（P<0.05）；经Western blotting检测，各处理组的透明带在约61、80、106 ku处均发生不同程度的泛素标记，通过灰度值分析差异显著（P<0.05）；进行体外受精试验后，发现对照组透明带精子黏附数最多，精子入卵数较少，添加30 μmol/L UCHL1抑制剂组的透明带精子黏附数最少，几乎没有精子入卵。结果显示，UCHL1抑制剂对猪卵母细胞的体外成熟有一定影响，随着UCHL1抑制剂浓度的增加，透明带发生泛素化的程度逐渐降低，且UCHL1可调节透明带精子黏附及多精入卵。

关键词：猪卵母细胞;UCHL1抑制剂;体外成熟;透明带泛素化;多精入卵

基金资助：国家自然科学基金（31260529）；吉林省科技厅重点科技攻关项目（20150204079NY）