他莫昔芬对猪伪狂犬病病毒体外增殖的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2022年第11期北京时间：

作者：邢嘉友, 樊文杰, 王昱旻, 鲁秀香, 宋月, 褚贝贝, 王江, 王梦迪

单位：1. 河南农业大学, 农业农村部动物生化与营养重点开放实验室, 郑州 450046;2. 河南牧业经济学院食品与生物工程学院, 郑州 450046

摘要：【目的】 研究他莫昔芬（Tamoxifen）在PK15细胞模型上对猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染的抗病毒作用。【方法】 以PK15细胞为模型，采用CCK-8细胞计数法检测他莫昔芬对细胞活力的影响；利用ANNEXIN V-FITC/PI凋亡试剂盒检测他莫昔芬对细胞周期和凋亡的影响；利用CytoFLEX流式细胞仪和荧光显微镜检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-GFP后病毒增殖的差异；利用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-QXX后PRV gB基因mRNA和蛋白表达水平的变化；利用病毒滴度测定法检测他莫昔芬处理细胞感染PRV-QXX后对病毒的抑制情况。【结果】 他莫昔芬用药浓度在6 μmol/L时对细胞活力无影响；在6 μmol/L以下时，与空白组相比，他莫昔芬处理组对细胞周期与凋亡没有显著影响（P>0.05）。在同一时间点，他莫昔芬处理组PRV-GFP在PK15细胞中的增殖速度极显著低于对照组（P<0.01）；实时荧光定量PCR结果表明，他莫昔芬处理后极显著抑制了PRV gB基因mRNA在PK15细胞中的表达（P<0.01）；Western blotting结果显示，不同给药浓度同一时间点，他莫昔芬都显著或极显著抑制了PRV gB蛋白的表达（P<0.05；P<0.01）；病毒滴度测定结果表明，在PK15细胞中，同一时间点他莫昔芬处理组的PRV-QXX子代病毒的复制速度显著或极显著低于对照组（P<0.05；P<0.01）。【结论】 他莫昔芬能显著抑制PRV在PK15细胞中的增殖。

关键词：他莫昔芬;伪狂犬病病毒(PRV);猪肾上皮细胞;抗病毒作用

基金资助：国家自然科学基金项目（32072858）