猪霍乱沙门菌抗噬菌体菌株筛选及受体基因突变位点分析

来源：中国畜牧兽医杂志2022年第11期北京时间：

作者：李晓宇, 张慧君, 迟新月, 李根, 王丽丽, 魏炳栋, 孙晓雯, 李纪彬, 徐永平

单位：1. 大连理工大学生物工程学院, 大连 116024;2. 吉林省农业科学院, 长春 130033;3. 大连赛姆生物工程技术有限公司, 大连 116620

摘要：【目的】 筛选抗噬菌体菌株并分析其受体基因突变位点，为解析猪霍乱沙门菌噬菌体抗性突变的产生机制提供理论依据。【方法】 以猪霍乱沙门菌CICC 21501及其裂解性噬菌体vB_SenS_S528（噬菌体S528）为研究对象，通过波动实验筛选自发突变的抗噬菌体菌株，观察菌落形态，并测定其对噬菌体的敏感性、吸附特性、生长曲线及对温度和pH的敏感性。通过全基因组重测序结合PCR验证定位耐受基因突变位点。【结果】 成功筛选出1株抗噬菌体S528的突变菌株，命名为B6-2。B6-2菌落边缘粗糙，与野生菌相比，生长曲线无显著差异，对pH表现出敏感性，在40、50 ℃时表现出温度耐受性。噬菌体S528对抗噬菌体菌株B6-2的吸附率减少60%（对野生菌吸附率为93%）。通过全基因组重测序及比对分析得知，B6-2菌株有3个位点发生了突变，分别为PROKKA_04510基因中2个位点和rfbC基因中的1个位点发生突变。突变基因片段的PCR产物电泳及测序结果均表明，PROKKA_04510基因上的2个位点并未发生突变，而真正发生突变的位点位于rfbC基因的350 bp处，碱基由C突变为T。【结论】 筛选到1株与受体改变有关的抗噬菌体菌株B6-2，其通过rfbC基因上的碱基突变来阻止噬菌体吸附。

关键词：猪霍乱沙门菌;噬菌体抗性;rfbC基因')">rfbC基因

基金资助：辽宁省"兴辽英才计划"项目（XLYC1907085）；大连市重点科技研发计划（2021YF16SN012）