鸡源凝结芽孢杆菌的分离鉴定及耐受性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2022年第11期北京时间：

作者：孙彦婷, 康宇, 詹妍, 张冬萱, 刘畅, 边传周, 张晓静, 白静, 乔宏兴

单位：1. 河南牧业经济学院动物医药学院, 郑州 450046;2. 河南省微生物生物转化中药工程实验室, 郑州 450046

摘要：【目的】 试验旨在寻找1株性能稳定、环境耐受性强的凝结芽孢杆菌菌株，以在实际生产中发挥其替抗功能。【方法】 本研究采集160日龄健康海兰褐蛋鸡的粪便样本，进行细菌分离纯化，并对分离菌进行形态学特征观察、生理生化鉴定、16S rDNA测序分析。通过绘制该菌的生长动力曲线确定其生长规律；利用耐酸、耐胆盐试验分析该菌株的耐受性；通过单因素试验对分离菌株的培养条件进行优化。【结果】 分离菌在普通培养基上长出表面粗糙、不规则的灰白色菌落，镜检为杆状、芽孢端生的革兰氏阳性菌。结合生化试验及16S rDNA基因序列分析综合鉴定该菌株为凝结芽孢杆菌，命名为NJ001。生长动力曲线表明，7~24 h为该菌株的对数生长期，24 h活菌数达到顶峰，凝结芽孢杆菌NJ001的最佳培养时间为24 h；耐受性试验结果显示，该菌株pH 3.0温育2 h存活率为59.5%，pH为4.0时存活率达到87.6%以上，对酸有较强耐受力；0.3%胆盐处理2 h存活率为54.0%，胆盐浓度升至0.5%时存活率仍有50%以上，该菌对胆盐有较强的耐受性。单因素试验结果发现，该菌的最佳培养温度为40 ℃，接种量2%，初始pH 7.0，摇床转速220 r/min。综合以上最佳培养条件，菌株活菌数可达最大值，为1.93×108 CFU/mL。【结论】 所分离的菌株为具有较强耐酸耐胆盐特性的凝结芽孢杆菌，其最适生长条件易于实现；且与动物体内胃肠道环境基本吻合，具备作为微生态制剂的应用潜力。

关键词：鸡;凝结芽孢杆菌;分离鉴定;耐受性

基金资助：河南省重点研发项目（221111111300）；河南省重点研发与推广专项项目（202102110247、192102110075）；河南省教育厅高等学校重点科研计划项目（16A230007）；河南牧业经济学院博士启动基金项目（53000212、2021HNUAHEDF004）；河南牧业经济学院教育教学改革研究与实践项目（2021-XJLX-139）；河南牧业经济学院预防兽医学科团队建设项目（MXK2016102）；河南牧业经济学院科技创新团队项目（2018KYTD13、2018KYTD16）；河