黄芪多糖对肠炎雏鸡小肠黏膜损伤的保护作用

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第1期北京时间：

作者：刘颖, 田旭, 冯晓梦, 吕晓萍, 高雪丽, 郑世民, 刘超男

单位：1. 东北农业大学动物医学学院, 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室, 哈尔滨 150030;2. 康龙化成(北京)新药技术股份有限公司, 北京 102200

摘要：【目的】探究黄芪多糖（Astragalus polysaccharide，APS）对雏鸡肠道形态和局部黏膜免疫的影响，阐明APS减轻肠炎雏鸡肠黏膜损伤的作用机制。【方法】在构建LPS诱导肠炎模型试验中，选取15只14日龄SPF雏鸡随机分为3组：对照组（Con）、低剂量脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）模型组（DL）和高剂量脂多糖模型组（DH），每组5只。对照组灌喂生理盐水，DL和DH组分别灌喂1和2 mg/kg BW LPS，连续处理3 d，取小肠组织，采用HE染色法观察小肠病理变化，采用实时荧光定量PCR检测白介素-1β（interleukin 1β，IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α） mRNA表达量，筛选构建肠炎模型的最佳LPS剂量。在APS对肠黏膜损伤的保护试验中，将20只7日龄雏鸡分为4组：对照组（C）、脂多糖炎症组（L）、黄芪多糖组（A）和黄芪多糖抑制炎症组（A+L），每组5只。A和A+L组从7日龄到试验结束每天自由饮用APS溶液（1.0 g/L），C组在此期间自由饮水；L和A+L组雏鸡14日龄时灌喂筛选所得剂量的LPS，连续3 d。取各组雏鸡胸腺、脾脏、法氏囊和小肠组织，计算雏鸡免疫器官指数；采用HE染色法观察雏鸡小肠黏膜形态，糖原PAS染色法检测杯状细胞数量，实时荧光定量PCR检测咬合蛋白-1（Occludin-1）、闭合蛋白-1（Claudin-1）和闭合小环蛋白-1（ZO-1） mRNA表达量。【结果】在构建LPS诱导肠炎模型试验中，DL、DH组雏鸡小肠组织均出现肠黏膜固有层充血、肠绒毛损伤等现象，且IL-1β和TNF-α mRNA表达量显著高于对照组（P<0.05），因此确定雏鸡灌喂1 mg/kg BW LPS建立肠炎模型。在APS对肠黏膜损伤的保护试验中，与对照组相比，L组雏鸡小肠绒毛破碎，固有层充血，免疫器官指数显著下降（P<0.05），小肠隐窝深度显著升高（P<0.05），绒腺比（V/C）显著下降（P<0.05），杯状细胞数量显著减少（P<0.05），紧密连接蛋白Occludin-1、Claudin-1和ZO-1的mRNA表达量均显著下降（P<0.05）；与L组相比，A+L组雏鸡免疫器官指数显著增加（P<0.05），肠黏膜损伤程度减轻，肠绒毛高度和绒腺比等指标显著升高（P<0.05），隐窝深度显著降低（P<0.05），杯状细胞数量显著增多（P<0.05），空肠和回肠紧密连接蛋白mRNA表达量均显著升高（P<0.05）；A组雏鸡杯状细胞数量相比于其他组明显增多，空肠和回肠紧密连接蛋白表达量也显著升高（P<0.05）。【结论】雏鸡灌喂1 mg/kg BW LPS可成功建立肠炎模型，1.0 g/L APS可优化肠道组织形态，促进雏鸡局部黏膜免疫系统的发育，可以保护肠炎雏鸡小肠组织及肠黏膜免受损伤，最终达到预防雏鸡细菌性肠炎的效果。

关键词：黄芪多糖(APS);肠炎;黏膜免疫;杯状细胞;紧密连接蛋白

基金资助：国家自然科学基金（31472169）；黑龙江省教育厅科学技术研究项目基金（12511029）