添加罗格列酮对小鼠卵母细胞氧化还原稳态的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第5期北京时间：

作者：张笑梦, 焦安惠, 王玉琪, 方南洙, 金庆国

单位：1. 延边大学农学院, 延吉 133002;2. 延边大学, 东北寒区肉牛科技创新教育部工程研究中心, 延吉 133002

摘要：【目的】探究在体外成熟培养基中添加罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对小鼠卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响,为体外成熟培养系统的优化提供参考。【方法】通过在体外成熟培养基中添加0、10、20、50、100 μmol/L RSG,统计第一极体(PBⅠ)排出率,确定RSG最适浓度。根据RSG最适浓度筛选结果分为对照组和罗格列酮组,通过免疫荧光染色法检测卵母细胞内活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、组织蛋白酶B(CB)、线粒体膜电位水平(MMP)及囊胚内总细胞数(Hoechst 33342)和细胞凋亡比率(TUNNEL);使用实时荧光定量PCR检测囊胚内抗氧化相关基因(Sod-2、Gpx-3和Cat)和凋亡相关基因(Caspase-3、Bcl-2和Bcl-xl)转录水平。【结果】与对照组相比,添加20 μmol/L RSG可显著提高小鼠卵母细胞第一极体排出率、卵裂率及囊胚率(P＜0.05);卵母细胞内ROS和CB水平均显著降低,GSH和线粒体膜电位水平均显著提高(P＜0.05);囊胚内总细胞数显著提高,细胞凋亡比率显著降低(P＜0.05);抗氧化相关基因(Sod-2、Gpx-3和Cat)和抗凋亡相关基因(Bcl-2和Bcl-xl)转录水平显著提高,促凋亡基因Caspase-3转录水平显著降低(P＜0.05)。【结论】在体外成熟培养基中添加RSG对卵母细胞内氧化还原稳态有积极作用,可改善线粒体功能,提高卵母细胞体外受精后发育能力,并降低卵母细胞内CB水平及囊胚内细胞凋亡的发生。

关键词：罗格列酮(RSG);小鼠;卵母细胞;体外成熟(IVM);体外受精(IVF)

基金资助：国家自然科学基金"氧化应激诱导的母型-合子型时期哺乳动物胚胎发育阻滞机理的研究"(32060756)