贝莱斯芽孢杆菌发酵对乳康方剂中药有效成分提取效果的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第6期北京时间：

作者：薛沾枚, 刘雪松, 张艳, 张备, 孟维珊, 张国华, 王岩, 钟鹏, 邱景会, 汤继龙, 史同瑞

单位：1. 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院, 齐齐哈尔 161005;2. 黑龙江省兽用药物重点实验室, 齐齐哈尔 161005;3. 黑龙江领康生物科技有限公司, 齐齐哈尔 161299

摘要：【目的】探究贝莱斯芽孢杆菌发酵对自拟乳康方剂中主要药物活性成分王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量变化的影响。【方法】试验建立测定乳康方剂中药中王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量的高效液相色谱（HPLC）检测方法，考察该方法的线性范围、精密度、稳定性、重复性、加样回收率；以乳康方剂中药王不留行、蒲公英、黄芪、当归、甘草药粉为主要成分占30%，黄豆粉占10%、CaCO3占0.2%、超纯水占59.8%，配制发酵中药培养基，发酵组接种2%（v/w）贝莱斯芽孢杆菌种子液混合均匀后发酵，发酵后加入2倍量水，反复文火煎煮，过滤为待测样；HPLC测定发酵与非发酵乳康方剂中药水煎提取液中的王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量。【结果】建立的测定乳康方剂中王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量的HPLC方法分别在0.01~0.5、5~120和10~100 μg/mL范围内线性关系良好，建立的方法经考察精密度、稳定性、重复性、加样回收率均良好。在相同物理提取条件下，经贝莱斯芽孢杆菌发酵的乳康方剂中药提取液中王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量分别为4.99、6.86和5.81 mg/mL，非发酵的乳康方剂中药提取液中王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁含量分别为3.70、3.01和3.27 mg/mL，二者相比差异极显著（P<0.01），说明贝莱斯芽孢杆菌适用于发酵乳康方剂中药，与非发酵水煎提取相比提取效果更佳，有利于王不留行黄酮苷、咖啡酸和芦丁药效活性成分释放。【结论】贝莱斯芽孢杆菌发酵乳康方剂中药能显著提高主要有效成分含量，为乳康方剂中药成分高效提取提供了技术参考。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌;泌乳;中药;发酵;有效成分

基金资助：黑龙江省重点研发计划项目（GA21B006）；黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院自拟课题（ZNKT-202219）