低氧对牦牛肺动脉平滑肌细胞增殖及氧化应激损伤作用的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第6期北京时间：

作者：李睿, 张伊阳, 罗雪慧, 周熳琳, 吴绍米, 杨琨, 乔自林

单位：1. 西北民族大学生命科学与工程学院, 兰州 730030;2. 西北民族大学生物医学研究中心, 甘肃省动物细胞技术创新中心, 兰州 730030;3. 国家民族事务委员会生物技术与生物工程重点实验室, 兰州 730030

摘要：【目的】通过研究低氧环境对牦牛（Bos grunniens）肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells，PASMCs）增殖及氧化应激损伤的影响，初步探究牦牛肺动脉平滑肌对低氧的适应性特点。【方法】分离纯化并利用α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）鉴定牦牛PASMCs。试验分为常氧组和低氧组，采用CCK-8法检测牦牛PASMCs在低氧和常氧状态下0、2、4、6、12、24、48、72、96、120 h的增殖效率；采用ELISA法检测常氧组和低氧组培养24、48、72、96 h细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）的蛋白浓度。【结果】细胞鉴定结果表明，95%以上的细胞均能表达α-SMA，即分离纯化所得细胞为牦牛PASMCs。CCK-8结果表明，低氧组在72、96、120 h细胞增殖倍数极显著低于常氧组（P0.05），CK、MDA蛋白浓度在24、48和72 h均显著高于96 h （P<0.05）。在常氧条件下，上清液中LDH蛋白浓度在48 h显著高于24、72 h （P<0.05）；SOD蛋白浓度在24、48 h均显著高于72、96 h （P<0.05）；CK蛋白浓度在24 h显著高于72、96 h （P<0.05）；MDA蛋白浓度在48 h显著高于72 h （P<0.05）。【结论】长时间低氧能够增强牦牛PASMCs氧化应激反应和细胞损伤，抗氧化作用减弱，细胞增殖效率显著降低，LDH、SOD、CK和MDA 4种蛋白在低氧条件下牦牛PASMCs损伤与抗损伤以及抗氧化中发挥重要调节作用，这可能与牦牛肺脏血管的低氧适应性有关。

关键词：牦牛;肺动脉平滑肌细胞(PASMCs);低氧;氧化应激

基金资助：国家自然科学基金（31860687）；甘肃省自然科学基金（21JR11RA024）；中央高校创新团队（31920200004）；教育部动物医学生物工程创新团队（IRT-17R88）；西北民族大学校级大学生创新创业训练计划（X202310742257）