产肠毒素大肠杆菌对断奶仔猪肠道形态、紧密连接蛋白及细胞外基质的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第7期北京时间：

作者：刘春艳, 唐青松, 杨必婧, 吴绮雯, 熊云霞, 黄艳娜, 杨雪芬, 王丽, 蒋宗勇, 易宏波

单位：1. 广东省农业科学院动物科学研究所, 畜禽育种国家重点实验室, 农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室, 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心, 广东省畜禽育种与营养研究重点实验室, 广州 510640;2. 广西大学动物科学技术学院, 南宁 530004

摘要：【目的】探究产肠毒素大肠杆菌（ETEC）对断奶仔猪肠道形态、紧密连接蛋白及细胞外基质（ECM）表达的影响。【方法】选取35日龄杜长大断奶仔猪12头，随机分成2组（每组6个重复，每个重复1头）：对照组灌喂20 mL生理盐水；产肠毒素大肠杆菌组（K88组）灌喂20 mL 1×109 CFU/mL ETEC K88悬浮液，连续灌喂3 d。试验期间所有仔猪自由采食和饮水，在试验第1和4天，以重复为单位称量仔猪体重，记录耗料量。计算每组的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）；在试验第4天屠宰并采集肠道组织样品，切片观察空肠和回肠的组织形态以及肠道内胶原纤维的含量；采用实时荧光定量PCR分析肠道紧密连接蛋白基因的表达；采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法测定ECM中胶原蛋白分子以及调控酶系的表达。【结果】与对照组相比，K88组仔猪平均日增重显著降低（P<0.05），平均日采食量极显著降低（P<0.01）；空肠绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度的比值极显著降低（P<0.01），回肠的绒毛高度也显著降低（P<0.05）；空肠闭锁蛋白（Occludin） mRNA表达量显著降低（P<0.05），闭合蛋白-1（Claudin-1） mRNA表达量极显著降低（P<0.01），回肠闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、Occludin mRNA表达量极显著降低（P<0.01），Claudin-1 mRNA表达量也显著降低（P<0.05）；空肠、回肠胶原纤维含量显著减少（P<0.05）；空肠Ⅳ型胶原蛋白α2链（COL4A2）、COL5A1、COL6A1的mRNA表达量极显著降低（P<0.01），空肠COL4A2以及COL6A1蛋白表达量均显著降低（P<0.05）；空肠基质金属蛋白酶9（MMP9） mRNA相对表达量显著增加（P<0.05），纤溶酶原激活物（PAs）的mRNA相对表达量则极显著降低（P<0.01）；MMP9蛋白含量极显著提高（P<0.01）。【结论】灌喂ETEC K88降低了断奶仔猪平均日增重以及平均日采食量，损伤肠道形态并降低肠道紧密连接蛋白的表达。并且可通过减少肠道中胶原纤维的含量、降低胶原蛋白分子以及ECM调控酶系的表达进而造成肠道中ECM的变化。

关键词：产肠毒素大肠杆菌;断奶仔猪;肠道紧密连接蛋白;细胞外基质

基金资助：茂名实验室科研启动项目（2021TDQD002）；茂名实验室重点项目（2022ZD003）；广州市科技计划项目（202201011372）；国家现代农业产业技术体系（CARS-35）；科技创新战略专项资金-高水平农科院建设（R2019PY-QF005、202106TD）