犬乳腺肿瘤他莫昔芬耐药细胞中差异表达circRNAs的筛选与分析

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第8期北京时间：

作者：徐恩爽, 杨春雪, 孙悦, 田雪, 郑家三, 刘云

单位：1. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院, 大庆 163000;2. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150000

摘要：【目的】筛选和分析环状RNA(circRNA)在犬乳腺肿瘤(CMGT)耐药中的作用,为肿瘤诊断和治疗提供新靶点。【方法】以CMGT细胞CHMm作为研究对象,首先通过浓度梯度法和浓度维持法构建CMGT他莫昔芬(TAM)耐药细胞系,然后采用CCK-8法检测CMGT细胞对TAM的敏感性,最后通过高通量测序技术筛选耐药细胞中差异表达的circRNAs,通过GO功能和KEGG信号通路分析其可能参与的生物过程。【结果】经过TAM持续刺激,CHMm形态变为长梭形,半数抑制浓度(IC50)由4.07提高至13.75 μmol/L,说明耐药细胞展现更强TAM抗性。测序结果显示,耐药细胞中差异表达的circRNAs 46个,GO功能分析涉及肿瘤细胞外基质、蛋白质类泛素化、细胞黏附和细胞迁移等过程,主要信号通路为Notch、Rap1、ErbB、FoxO和PI3K等通路。【结论】本研究成功构建犬乳腺肿瘤TAM耐药细胞系CHMmTAM,耐药细胞展现更强的增殖能力和TAM抗性。高通量筛选了亲本和耐药细胞中差异表达的circRNAs,耐药性产生可能通过Notch、Rap1和ErbB通路影响细胞信号转导、细胞泛素化、细胞转移等生物学过程,最终参与肿瘤耐药。

关键词：犬乳腺肿瘤;circRNA;他莫昔芬耐药;Notch通路

基金资助：国家自然科学基金(31872527);黑龙江八一农垦大学学成、引进人才科研启动计划(XYB202112)