蒙古羊双羔性状基因ADAMTS-1作用机制研究

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第8期北京时间：

作者：赵梦瑶, 陈晓良, 李秀男, 苏乐德, 田瑛, 菅瑞珍, 杨燕燕, 李海军

单位：1. 内蒙古自治区农牧业科学院, 呼和浩特 010031;2. 内蒙古农业大学兽医学院, 呼和浩特 010018

摘要：【目的】以产单、双胎蒙古羊为动物模型初步探究双羔主效基因含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)的作用机制,为蒙古羊高效繁育及其相关研究提供理论依据。【方法】选取具有产单、双胎记录的雌性蒙古羊各12只,采用自然发情方式,通过阴道黏膜涂片和公羊爬跨确定雌性蒙古羊的发情期和间情期,分别取产双羔发情期(DE)、产双羔间情期(DD)、产单羔发情期(SE)、产单羔间情期(SD)蒙古羊卵巢,利用HE染色的方式观察卵巢有腔卵泡形态差异。取蒙古羊卵巢颗粒细胞进行培养,运用免疫荧光技术确定ADAMTS-1表达位置。通过实时荧光定量PCR技术检测ADAMTS-1、孕酮受体(PGR)、丝裂原活蛋白激酶4(MAPK4)、雄激素受体 (AR)、丝氨酸蛋白酶抑制剂2(SERPINE2)、多功能蛋白聚糖蛋白聚糖(Versican)在不同组别中的mRNA相对表达水平,并通过Western blotting技术检测ADAMTS-1前体蛋白(pro-ADAMTS-1)和成熟蛋白(MP-ADAMTS-1)在不同组别中的蛋白相对表达水平。【结果】通过HE染色结果可以确定产单、双胎蒙古羊卵巢组织内有腔卵泡形态无表观差异,运用免疫荧光方法检测到ADAMTS-1在蒙古羊卵巢颗粒细胞上表达。通过荧光定量PCR及Western blotting结果可知,DE组蒙古羊中ADAMTS-1在卵巢组织中基因及蛋白表达量显著高于其他3组(P＜0.05),而在SE与SD组无显著差异(P＞0.05);SE组蒙古羊卵巢组织内AR和PGR基因表达量最高,且显著高于其他3组(P＜0.05),DE组显著高于DD组(P＜0.05),且在同一发情阶段产单羔蒙古羊卵巢组织内AR、PGR基因表达量显著高于产双羔蒙古羊卵巢组织;SE组蒙古羊卵巢内MAPK4基因表达量最高,且显著高于其他3组(P＜0.05),其他3组间无显著差异(P＞0.05);DD组蒙古羊卵巢组织内Versican、SERPINE2基因表达量最高,且显著高于DE和SD组(P＜0.05);SE组这两个因子显著高于SD组(P＜0.05)。【结论】ADAMTS-1于蒙古羊卵巢颗粒细胞中稳定表达,ADAMTS-1对蒙古羊双羔性状的排卵机制具有重要的正向调控作用,而其他多种激素受体以及胞内关键信号基因也与卵巢内卵泡的发育、排出密切相关。

关键词：蒙古羊;ADAMTS-1;双羔性状;卵巢

基金资助：内蒙古自治区自然基金项目面上项目(2020MS03062)