双组分系统resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压应激能力及致病性的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第9期北京时间：

作者：郭骞, 张钰, 方小伟, 袁梅, 郑明浩, 刘芳, 方春

单位：1. 长江大学动物科学学院, 荆州 434025;2. 衡水市动物卫生监督所, 衡水 053000

摘要：【目的】构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株,并探究其抗渗透压应激能力及致病性。【方法】利用同源重组方法构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株,通过不同环境生长曲线比较分析单增李斯特菌野生株10403S与缺失株ΔresE/resD的生存性能差异;通过应激存活试验探究resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压能力的影响;通过对结肠癌细胞Caco-2及胃腺癌细胞MGC803进行细胞黏附、侵袭试验以及小鼠毒力试验,评估resE/resD基因缺失对单增李斯特菌细胞黏附与侵袭能力及小鼠致病性的影响。【结果】生长曲线结果显示,resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌正常生长,在5% NaCl条件下缺失株ΔresE/resD生长能力弱于野生株10403S,平台期抗渗透压应激能力显著降低(P＜0.05)。应激存活试验结果表明,在10% NaCl条件下应激处理1 h后,缺失株ΔresE/resD存活率极显著低于野生株10403S(P＜0.01)。Caco-2及MGC803细胞侵袭试验结果显示,缺失株ΔresE/resD对细胞黏附能力显著减弱(P＜0.05),且细胞侵袭能力极显著降低(P＜0.01)。小鼠毒力试验结果显示,缺失株ΔresE/resD小鼠脾脏与肝脏中细菌载量极显著或显著低于野生株10403S(P＜0.01;P＜0.05)。【结论】双组分系统resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌野生株10403S正常生长,但缺失株ΔresE/resD表现出抗渗透压应激能力下降,且减弱了单增李斯特菌对细胞黏附侵袭力和小鼠致病性。

关键词：单增李斯特菌;双组分系统;resE/resD基因')">resE/resD基因;渗透压应激;致病力

基金资助：国家自然科学基金青年基金项目(31802208);湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20221302)