1株猫嵌杯病毒的分离鉴定及全基因序列分析

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第9期北京时间：

作者：陈昌毅, 李根, 何红玲, 陈昱彤, 黄学喆, 罗均, 郭霄峰

单位：华南农业大学兽医学院, 广州 510642

摘要：【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus,FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒空斑纯化试验对其进行纯化和扩繁。电镜下观察纯净化分离病毒的形态。通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)测定病毒的半数组织培养感染剂量(median tissue culture infectious dose,TCID50)及不同收毒时间的病毒滴度,绘制分离病毒的一步生长曲线。对分离病毒全基因序列进行核苷酸序列测定,并对其遗传进化及相似性进行分析。【结果】从疑似患猫的粪便病料中分离获得1株FCV,经空斑纯化后,该毒株会导致F81细胞发生皱缩、变圆、葡萄串样聚集和脱落等细胞病变效应。在电镜下病毒粒子呈圆形、直径35~39 nm、无囊膜。IFA结果显示,分离病毒可与兔源FCV VP1-F蛋白特异性多克隆抗体发生结合,在荧光显微镜下可见明显特异性荧光,病毒滴度为1×109 TCID50/mL。分离病毒基因组全长为7 722 bp,与FCV-SH毒株核苷酸相似性最高,为83.94%,属于同一分支。VP1基因与FCV-SH1902毒株核苷酸相似性最高,为81.32%,与FCV-SH1901毒株氨基酸相似性最高,为89.99%。【结论】本研究成功分离到1株FCV,并对其全基因序列进行分析。该研究为FCV致病机理及疫苗研究奠定了基础。

关键词：猫嵌杯病毒(FCV);分离鉴定;基因测序;遗传进化分析

基金资助：广东省重点研发计划(2019B020218004)