SCF基因;表达载体;黑色素细胞">
《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:陈旭, 董依萌, 邢秀梅, 杨苏坤, 刘欣
单位:1. 东北林业大学野生动物与自然保护地学院, 哈尔滨 150040;2. 中国农业科学院特产研究所, 长春 130112
摘要:【目的】探究干细胞因子(stem cell factor,SCF)对梅花鹿色素合成过程的影响。【方法】构建梅花鹿SCF基因野生型(SCF1-9)和突变型(SCF789)表达载体并转染HEK293细胞。用孵育HEK293细胞的培养液培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),模拟SCF在机体的转运过程,检测B16细胞的黑色素含量及酪氨酸酶活性;用RT-PCR法检测小眼症转录因子M型(MITF-M)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、TYRP2、溶质载体家族45成员2(SLC45A2)、SRY盒转录因子10(SOX10)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的mRNA表达量;用Western boltting检测MITF-M、TYR蛋白表达水平。【结果】SCF1-9组黑色素含量、酪氨酸酶活性和MITF-M、TYR、SOX10基因mRNA表达量及TYR和MITF-M的蛋白表达量与对照组、SCF789组相比均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。SCF1-9组SCL45A2基因mRNA表达量与SCF789组相比显著升高(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。【结论】梅花鹿SCF基因通过SCF/c-kit信号通路调节色素基因MITF-M、SOX10、TYR、SLC45A2表达,促进色素合成。试验结果为进一步研究色素合成相关基因的表达调控提供理论依据。
关键词:梅花鹿;SCF基因')">SCF基因;表达载体;黑色素细胞
基金资助:中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2021-ISAPS)