1株沙门氏菌噬菌体的分离鉴定和特性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第10期北京时间：

作者：廖彬如, 余春燕, 黄巧辰, 莫玉鹏, 黄炜乾, 李磊, 韩凯欧, 王乐平, 李珣, 王晓晔

单位：1. 广西大学动物科学技术学院, 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心, 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室, 广西高校动物疫病预防与控制重点实验室, 南宁 530004;2. 桂林力源集团, 桂林 541012;3. 广东容大生物股份有限公司, 清远 515000

摘要：【目的】分离有效裂解沙门氏菌的噬菌体,为探索新的沙门氏菌防控方法提供理论依据和参考。【方法】以鸡白痢沙门氏菌X-1014为宿主菌,通过双层琼脂平板法从污水中分离并纯化出噬菌体。采用噬菌斑与电子显微镜观察、宿主谱测定、生物学特性测试、体外抑菌试验及噬菌体的全基因组测序分析方法评估该噬菌体。【结果】分离纯化出1株能裂解沙门氏菌和大肠杆菌的裂解性噬菌体,命名为ZH5(GenBank登录号:OM864357.1)。双层平板法结果显示,噬菌斑透亮且边缘清晰。电镜观察显示,噬菌体ZH5头部呈二十面体、头部直经约50 nm,尾部长度约20 nm。宿主谱分析结果显示,噬菌体ZH5能裂解3株沙门氏菌和1株大肠杆菌。生物学特性结果显示,最佳感染复数为10,潜伏期和爆发期分别为20和60 min,裂解量约为139 PFU/cell;酸碱耐受范围为pH 4.0~10.0,且在温度为4~50 ℃的环境中能存活30 min。体外抑菌结果显示,当感染复数为10时,噬菌体ZH5对沙门氏菌X-1014和CVCC 1806抑制效果最佳。全基因组分析结果显示,该噬菌体全长为42 949 bp,GC含量为51.41%,其中已知功能编码序列(coding sequences,CDS)占比为52%。线性比对分析结果显示,噬菌体ZH5与大肠杆菌噬菌体 Minorna相似性最高(相似性94.19%;覆盖率84%)。系统发育进化树分析表明,噬菌体ZH5属于Drulisvirus属。【结论】本研究分离出1株能跨宿主裂解沙门氏菌和大肠杆菌的噬菌体,为进一步研究沙门氏菌抗菌剂提供了良好的材料。

关键词：沙门氏菌;噬菌体;生物学特性;体外抑菌效果;全基因组分析

基金资助：南宁市重点研发计划(20212023)；良庆区重点研发计划(202109)；防城港市重点研发计划(AB21014016)；武鸣区重点研发计划(20210102)；江南重点研发计划(20220620-2)