单宁酸对猪流行性腹泻病毒增殖的体外抑制作用

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第10期北京时间：

作者：曾一桐, 朱靓芸, 童庆芳, 黄一智, 李中华, 吴涛, 侯永清

单位：1. 武汉轻工大学, 动物营养与饲料科学湖北省重点实验室, 武汉 430023;2. 武汉轻工大学, 动物营养与饲料安全湖北省协同创新中心, 武汉 430023;3. 武汉市江夏区动物疫病预防控制中心, 武汉 430072

摘要：【目的】探究单宁酸(tannic acid)对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的影响,为临床治疗PEDV感染提供新的参考依据。【方法】通过检测不同浓度单宁酸对细胞活性的影响,评估单宁酸对Vero和LLC-PK1细胞的毒性;通过实时荧光定量PCR和间接免疫荧光试验检测单宁酸对PEDV YN13毒株复制的影响;将PEDV YN13毒株更换为PEDV DR13-GFP毒株、Vero细胞系换成LLC-PK1细胞系分别进行试验,检测单宁酸对PEDV复制的影响;在病毒感染的不同时间点添加单宁酸,通过实时荧光定量PCR、Western blotting和半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infection dose,TCID50)法检测单宁酸对PEDV复制的影响;通过荧光共振能量转移试验检测单宁酸在细胞外对PEDV 3C样蛋白酶活性的影响。【结果】低浓度的单宁酸对细胞几乎无毒性;单宁酸能够有效抑制PEDV YN13毒株的复制,且单宁酸的浓度越高抑制效果越好;在更换毒株和细胞系后,各浓度单宁酸对PEDV的复制过程仍有较好的抑制作用;单宁酸可以通过抑制PEDV吸附或入侵过程及病毒的早期复制发挥抗病毒活性;单宁酸对PEDV 3C样蛋白酶活性具有抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性。【结论】单宁酸可以在体外通过影响病毒吸附或入侵过程抑制PEDV的感染,也可能通过抑制病毒的3C样蛋白酶的活性抑制病毒的复制过程。

关键词：单宁酸;猪流行性腹泻病毒(PEDV);3C样蛋白酶;抗病毒

基金资助：国家自然科学基金区域联合创新发展基金(U22A20514)