羊源产酸克雷伯菌的分离鉴定及感染小鼠的转录组学研究

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第10期北京时间：

作者：李旭博, 蒋俊明, 何美荣, 李昊洋, 李虹, 陈思, 陈巧玲, 满初日嘎, 杜丽, 王凤阳, 高宏岩

单位：海南大学动物科技学院, 海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室, 海口市动物基因工程重点实验室, 海口 570228

摘要：【目的】分离鉴定羊源产酸克雷伯菌,探讨产酸克雷伯菌对动物的致病机制。【方法】采集海南黑山羊肺脏组织样品进行细菌分离培养,通过生化试验及16S rRNA基因检测方法对分离株进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验、小鼠致病性试验、RNA-Seq分析和差异表达基因(DEGs)分析。【结果】分离出1株革兰阴性短杆状细菌,胰蛋白胨大豆琼脂培养基上为光滑圆形的乳白色菌落。分离菌能分解葡萄糖、乳糖、蔗糖等几种碳水化合物,靛基质试验阳性。16S rRNA基因检测结果显示,分离株与已公布序列的相似性＞99%,鉴定该分离菌为产酸克雷伯菌,命名为KOHN1。药敏试验结果显示,分离菌KOHN1对青霉素、苯唑青霉素、氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢氨苄、麦迪霉素、万古霉素和克林霉素具有耐药性,而对于其余21种抗菌药敏感。分离菌KOHN1攻毒小鼠后,肺脏组织病理学切片观察到小鼠肺部充血、水肿和渗出等急性炎症。DEGs富集分析显示,炎症细胞因子和趋化因子的DEGs在小鼠肺脏中大量表达。【结论】本试验成功分离出1株产酸克雷伯菌,分离株对小鼠致病性较强,免疫反应通路在病菌侵染过程中发挥着重要作用。该研究结果为后续产酸克雷伯菌的临床预防、诊疗及药物研发提供了参考依据。

关键词：海南黑山羊;产酸克雷伯菌;分离鉴定;RNA-Seq;免疫机制

基金资助：海南省院士创新平台科研专项(YSPTZX202153)；海南省院士团队创新平台资金项目；国家现代农业产业技术体系项目(财政部和农业农村部-CARS38)；中央支持地方科技发展资金项目(ZY2022HN09)；海南大学科研启动基金项目(KYQD(ZR)22167)