高效液相色谱法检测鼠饲料中抗菌肽NZ2114

来源：中国畜牧兽医杂志2023年第11期北京时间：

作者：冯亚楠, 杨娜, 毛若雨, 郝娅, 马炫炫, 滕达, 王建华

单位：1. 中国农业科学院饲料研究所, 基因工程研究室, 北京 100081;2. 农业农村部饲料生物技术重点实验室, 北京 100081

摘要：【目的】本研究旨在建立鼠粉状饲料中抗菌肽NZ2114固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）快速分析方法，用于检测低、中、高浓度（2、10和50 g/kg）的鼠粉状饲料中受试物NZ2114含量，以分析抗菌肽NZ2114是否均匀分布。【方法】试验分别对提取条件、净化柱和净化方法进行优化，并考察了提取剂、提取时间对提取效率的影响，SPE清洗剂、洗脱剂等对回收率的影响。饲料样品经超声提取后离心，上清液经WCX固相萃取柱富集，随后用3 mL甲醇和5 mL 20%氨化甲醇进行净化洗脱。HPLC检测方法以ZORBAX Eclipse Plus C18作为固定相，0.1%甲酸-乙腈和0.1%甲酸-水作为流动相，柱温35 ℃，进样量20 μL，以1.0 mL/min流速，按照梯度洗脱的方式洗脱，在波长276 nm下采用外标法定量检测饲料样品中NZ2114含量，并对该方法的线性、检测限与定量限、基质效应、回收率、日内与日间精密度进行考察。【结果】SPE-HPLC分析方法在62.5~4 000 μg/mL浓度范围内线性关系良好，线性方程为y＝0.9353x-32.721，相关系数（R2）为0.9996，低、中、高浓度下该方法的添加回收率范围在88.05%~111.23%，日内精密度为0.58%~4.45%，日间精密度为3.18%~6.37%，125、500和2 000 μg/mL浓度下基质效应分别为1.02、1.01和0.99。【结论】本研究建立了鼠饲料中抗菌肽NZ2114的SPE-HPLC检测方法，符合方法学考察要求，具有灵敏度和精密度高、重现性好、快速等优点，能够实现3个浓度水平饲料样品中NZ2114的精准定量。

关键词：高效液相色谱;固相萃取;抗菌肽NZ2114;鼠饲料

基金资助：中国农业科学院科技创新工程重大科研任务"畜禽用抗生素替代关键产品创制与产业"（CAAS-ZDRW202111）；中国农业科学院科技创新工程"抗菌肽及抗生素替代品方向"（CAAS-ASTIP-2013-FRI-02）