白血病抑制因子对牛卵母细胞体外发育能力的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第2期北京时间：

作者：莫显红, 陶庆华, 房义, 梁婧, 张佳音, 梁小航, 徐振军

单位：1. 赤峰学院化学与生命科学学院, 赤峰 024000;2. 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院), 福州 350002;3. 中国科学院东北地理与农业生态研究所吉林省草地畜牧重点实验室, 长春 130062;4. 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院, 呼和浩特 011517

摘要：【目的】探究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)对牛卵母细胞和早期胚胎发育能力及多潜能基因表达的影响。【方法】将牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes,COCs)分为4组,对照组:在卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)和胚胎体外培养(in vitro culture,IVC)过程中均不添加LIF溶液;处理组1(T1组):IVM过程添加25 ng/mL LIF,IVC过程不添加LIF;处理组2(T2组):IVM过程不添加LIF,IVC过程添加25 ng/mL LIF;处理组3(T3组):IVM和IVC全过程均添加25 ng/mL LIF。用Fluo-3荧光指示剂检测卵母细胞胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度;挑选有第一极体排出的卵母细胞进行孤雌激活,统计各组卵母细胞卵裂率和囊胚率;利用实时荧光定量PCR检测囊胚中多潜能基因的相对表达量。【结果】与对照组相比,培养8 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著下降(P＜0.01);培养24 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著升高(P＜0.01)。T1和T3组孤雌激活后卵裂率和囊胚率均显著高于对照组,且T3组囊胚率显著高于T1和T2组(P＜0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,T3组囊胚中POU结构域5类转录因子1(POU5F1)和同源框蛋白(NANOG)基因表达量均显著高于对照组,尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因表达量显著低于对照组(P＜0.05)。【结论】在IVM过程中添加LIF可提高卵母细胞的发育能力,在IVM＋IVC全过程添加LIF对早期胚胎发育和多潜能基因的表达有积极作用。

关键词：白血病抑制因子;多潜能基因;钙离子;胚胎发育