LIPI-3和LIPI-4共存对致病性单核细胞增生李斯特菌毒力的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第5期北京时间：

作者：钱瑞宣, 李楠, 康立超, 马勋, 刘彩霞, 史唯地, 寇丽君, 任慧杰, 祁亚涛, 殷中科, 刘璐, 王静, 王正荣, 蒋建军

单位：1. 新疆农垦科学院, 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室, 石河子 832000;2. 石河子大学动物科技学院, 石河子 832000;3. 新疆农垦科学院农业质量标准与检测技术研究所, 石河子 832000

摘要：【目的】探究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)毒力岛3(LIPI-3)和LIPI-4共存对LM毒力的影响,揭示它们对细菌毒力的潜在调节作用,为进一步研究LM的致病机制提供依据。【方法】以LM928(存在LIPI-4)和LM873(同时存在LIPI-3和LIPI-4)2个LM菌株为研究对象,通过侵染HCMEC/D3细胞监测2种菌株对HCMEC/D3细胞的黏附和侵袭情况;通过鸡胚感染试验评估2株菌对鸡胚半数致死量(LD50)的影响;采用溶血试验来测定菌株的溶血活性;通过流式细胞仪分析HCMEC/D3细胞凋亡情况,以评估菌株诱导细胞凋亡的能力;利用实时荧光定量PCR技术比较2株菌在BHI培养条件下及感染HCMEC/D3细胞后毒力基因的转录水平差异。【结果】LM928和LM873株的黏附率无显著差异(P＞0.05),LM928株的侵袭率极显著高于LM873株(P＜0.01)。LM873株的LD50是LM928株的约1 000倍;LM928和LM873株的溶血价分别为24和23。LM928株感染24和48 h后诱导的细胞凋亡率显著或极显著高于LM873株(P＜0.05;P＜0.01),而LM873株的凋亡率与对照组间无显著差异(P＞0.05)。LM928和LM873株在BHI培养基中培养时,与LM928株相比,LM873株毒力基因mpl、inlB、inlC、inlP、actA、plcA、plcB和sigB的转录水平均显著或极显著上调(P＜0.05;P＜0.01),毒力基因hly、inlA和iap的转录水平均极显著或显著下调(P＜0.01;P＜0.05)。LM928和LM873株侵染HCMEC/D3细胞后,与LM928株相比,LM873株毒力基因inlP、actA、plcA、plcB和prfA的转录水平均显著或极显著上调(P＜0.05;P＜0.01);毒力基因hly、mpl、inlA、inlB、inlC和iap的转录水平均极显著下调(P＜0.01)。【结论】LIPI-3和LIPI-4共存降低了LM的毒力,该结果对进一步研究LIPI-3和LIPI-4在细菌毒力调控中的分子机制和复杂的相互作用具有重要意义。

关键词：单核细胞增生李斯特菌(LM);LIPI-3;LIPI-4;毒力;毒力基因

基金资助：国家自然科学基金(32160833、32160834、32260895);省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室开放课题(MYSKLKF201905);江苏省人兽共患病学重点实验室(R1901)