1株猪源A型产气荚膜梭菌的分离鉴定及致病性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第6期北京时间：

作者：吴钰兴, 邹潍力, 程子馨, 莫玉鹏, 张凌源, 纪宛彤, 陈思宇, 郑浩东, 麻润雯, 李珣, 李茂宁, 王晓晔

单位：1. 广西大学动物科学技术学院, 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心, 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室, 广西高校动物疫病预防与控制重点实验室, 南宁 530004;2. 广西桂林力源集团, 桂林 541012;3. 重庆市渝东卫生学校, 重庆 408300;4. 桂林市动物疫病预防控制中心, 桂林 541000);5. 东莞市动物疫病预防控制中心, 东莞 523000

摘要：【目的】探究A型产气荚膜梭菌在仔猪腹泻中的致病性,为A型产气荚膜梭菌感染所致腹泻的诊断和治疗提供理论依据和参考。【方法】通过培养特性和革兰染色镜检对分离菌进行初步鉴定,通过生化试验、毒素基因PCR扩增、16S rRNA序列比对并构建进化树对可疑菌株进一步鉴定,利用药敏试验和动物回归试验研究分离菌株的耐药性和致病性。【结果】分离菌株在TSN平板上呈黑色菌落,在血平板上呈α、β双溶血环,革兰染色呈紫色粗大杆菌。生化试验结果显示,分离菌株葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、还原性硝酸盐试验、H2S试验和明胶液化均呈阳性,甘露醇、吲哚试验和水杨酸结果呈阴性。16S rRNA序列比对结果显示,分离菌与NCBI数据库中已公布的产气荚膜梭菌16S rRNA基因序列相似性均＞99%,鉴定该菌株为产气荚膜梭菌。PCR扩增出plc及cpb2基因,表明该菌株为携带β2毒素的A型产气荚膜梭菌。药敏试验结果显示,分离菌株对青霉素G、庆大霉素、林可霉素、磺胺异噁唑、环丙沙星、诺氟沙星耐药。动物回归试验结果显示,攻菌后仔猪粪便中可检出大量产气荚膜梭菌,该菌株可引起仔猪腹泻,死亡率达50%;死亡仔猪剖检可见小肠充血、出血、鼓气,从脾脏、小肠中可分离出产气荚膜梭菌,且在损伤严重的空肠肠段中分离出高载量A型产气荚膜梭菌。【结论】本试验成功分离出1株A型产气荚膜梭菌,可引起新生仔猪发病,致病性较强,该研究结果为A型产气荚膜梭菌感染仔猪的诊断、流行病学调查、治疗提供了参考依据。

关键词：A型产气荚膜梭菌;新生仔猪;分离鉴定;致病性

基金资助：国家自然科学基金项目(32360902、32360864);广西自然科学基金项目(2021GXNSFAA196058);广西重点研发计划(AB21238003);南宁市重点研发计划(20212023)