屎肠球菌FDT2的分离鉴定及抑菌特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第7期北京时间：

作者：张晓勇, 蓝伟, 王雅, 劳健龙, 李志, 贾丹, 孔祥颖, 胡凯茵, 温咏森, 吕舒婷, 陈曼, 殷宏, 李有全

单位：1. 兰州理工大学生命科学与工程学院, 兰州 730050;2. 广东海洋大学滨海农业学院, 湛江 524088;3. 青海大学, 青海省畜牧兽医科学院, 西宁 810016;4. 中国农业科学院兰州兽医研究所, 家畜疫病病原生物学国家重点实验室, 兰州 730046;5. 海北州农牧综合服务中心, 海北 810299

摘要：【目的】从牦牛粪便中分离和鉴定屎肠球菌并进行体外抑菌特性研究,以期筛选出具有优良抑菌特性的益生菌。【方法】用MRS培养基从青海省健康牦牛粪便中分离肠球菌,结合形态学和分子生物学鉴定后进行抑菌性研究。通过发酵过滤分离菌株上清液,采用打孔法观察其对应的抑菌效果,通过改变pH及加入过氧化氢酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶等方法来分析其抑菌物质,并探究温度和pH对菌株发酵上清液的影响。【结果】结合形态学及系统进化树分析表明,分离的2株菌(FDT2和D2)均为屎肠球菌。抑菌试验结果表明,屎肠球菌FDT2对5株致病菌均有抑制作用,其中对产肠毒素性大肠杆菌K88和大肠杆菌ATCC 43888的抑菌性最强,而屎肠球菌D2对5株致病菌均无明显抑菌作用。通过排酸试验证明,屎肠球菌FDT2发酵上清液中起抑菌作用的不是酸性物质;通过加入过氧化氢酶试验证明了抑菌物质中有过氧化氢存在,且发挥部分的抑菌作用;加入胃蛋白酶和胰蛋白酶后其抑菌圈直径极显著低于对照组(P＜0.01),表明抑菌物质中包含细菌素,且在抑菌过程中发挥重要作用。随着温度的逐渐升高,屎肠球菌FDT2的抑菌能力有所降低,在100 ℃下仍有抑菌性,表明其具有较强的热稳定性。随着pH的升高,屎肠球菌FDT2的抑菌活性逐渐下降,说明细菌素在酸性环境下活性较强。【结论】试验共分离到2株菌,其中屎肠球菌FDT2具有良好的抑菌特性,能分泌细菌素等抑菌物质,有必要对其深入研究。

关键词：屎肠球菌;鉴定;形态学;抑菌性

基金资助：广东海洋大学科研启动费(060302052201);大通县科技计划项目(2023-ZB-1);宁夏回族自治区重点研发计划项目(2022BBF03024);减抗替抗益生菌制剂示范推广;国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS-37);“十三五”重点研发计划(2018YFD0501804、2017YFD0501200)