河曲马源大肠杆菌耐药相关基因检测及外排泵抑制剂对其生物被膜的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第8期北京时间：

作者：赵星, 梁军, 李阳, 杨丹娇, 陈朝喜

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 郑州市产品质量检验检测中心, 郑州 450052;3. 四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所, 甘孜 626000

摘要：【目的】了解河曲马源大肠杆菌的耐药情况,为兽医临床合理使用抗菌药物提供基础理论指导。【方法】采用细菌形态学、革兰染色镜检、16S rDNA序列分析等方法进行细菌分离鉴定。采用微量肉汤稀释法和PCR扩增方法对分离鉴定的大肠杆菌进行抗菌药物敏感性试验及耐药基因、整合酶基因、外排泵基因携带情况检测。同时,采用改良结晶紫半定量方法进行生物被膜形成能力测定。利用棋盘法测定13种外排泵抑制剂与多西环素联用对生物被膜的清除作用。【结果】分离株在伊红-美蓝琼脂培养基上为具有绿色金属光泽的紫黑色菌落,在大肠杆菌/大肠菌群显色培养基上为蓝色菌落,革兰染色镜检可见粉红色短杆状细菌。经16S rDNA测序比对与大肠杆菌高度相似的分离株为64株。64株大肠杆菌分离株对酰氨醇类、磺胺类及利福霉素类药物耐药率相对较高并出现多重耐药菌株,其中20.31%(13/64)表现出对5类抗菌药物耐药;检测到21个耐药基因、1个整合酶基因及6个外排泵基因为阳性;整合酶基因intl1检出率为89.06%。生物被膜形成能力为强、中、弱及无成膜能力的大肠杆菌分别为8(12.50%)、34(53.13%)、20(31.25%)和2(3.12%)株。外排泵抑制剂与多西环素联合能增强对生物被膜的清除能力。【结论】河曲马源大肠杆菌耐药较为严重,应进一步加强青海省河南蒙古族自治县赛马的用药监管力度,减少或避免多重耐药菌株的出现及耐药性广泛传播。

关键词：河曲马;大肠杆菌;多重耐药性;生物被膜;外排泵

基金资助：四川省科技厅项目(2016KZ0007、2023NSFSC0179);西南民族大学专业学位联合培养基地项目(2022-No.13)