EGCG调控PI3K/Akt通路对CIS诱导大鼠急性肾损伤的作用机制研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第8期北京时间：

作者：杨春雪, 孙悦, 田雪, 徐恩爽, 郑家三

单位：黑龙江八一农垦大学, 大庆 163000

摘要：【目的】探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对顺铂(cisplatin,CIS)诱导的大鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的保护效果和作用机制,以期为CIS和EGCG的临床用药提供试验基础。【方法】选取40只雄性Wistar大鼠,随机均分为5组。CON和CIS组大鼠灌胃生理盐水;EGCG、CE和抑制剂组大鼠灌胃40 mg/kg EGCG,连续28 d;在第26天,CIS、CE及抑制剂组大鼠腹腔注射7 mg/kg CIS,CON和EGCG组大鼠注射等量生理盐水,此外抑制剂组大鼠腹腔注射5 mg/kg LY294002,连续3 d。第29天采集所有大鼠的肾脏组织,采用HE染色及透射电镜观察肾脏组织病理和细胞线粒体形态变化;利用Western blotting检测各组大鼠肾脏中自噬蛋白(LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG5、ATG12、Beclin-1、p62)、通路蛋白(PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt)的表达情况;通过免疫荧光法检测肾脏中自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达水平。【结果】HE染色及透射电镜结果显示,预处理EGCG缓解了CIS诱导大鼠肾小管上皮细胞坏死和脱落、炎性细胞浸润及细胞线粒体肿胀变性和线粒体嵴断裂。Western blotting结果显示,与CON组相比,CIS组大鼠肾脏中LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG5、ATG12、Beclin-1表达量极显著升高(P＜0.01),p62、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt表达量极显著降低(P＜0.01),而预处理EGCG组逆转了这一现象。免疫荧光结果显示,与CE组相比,抑制剂组大鼠病理损伤加重,LC3Ⅱ/Ⅰ荧光信号增强,p62荧光信号减弱。【结论】预处理EGCG可以通过激活PI3K/Akt信号通路抑制细胞自噬,从而缓解CIS诱导的大鼠AKI,而这种保护作用可以被PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002抵消。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯;PI3K/Akt通路;急性肾损伤;顺铂

基金资助：黑龙江省省属高等学校基本科研业务费(TDJH201903-3)