基于网络药理学和试验验证探讨茵陈蒿汤治疗糖尿病的作用机制

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第9期北京时间：

作者：宋雨, 孙彦刚, 张艺媛, 周思奇, 张璐, 李伟, 张明昊, 张紫娟, 苗晋鑫, 陈芳, 曹珊, 张小莉, 谢莎

单位：1. 河南中医药大学医学院, 郑州 450046;2. 河南中医药大学中医药科学院, 郑州 450046;3. 河南中医药大学护理学院, 郑州 450046

摘要：【目的】 通过网络药理学、分子对接和试验验证的方法探讨茵陈蒿汤(YCHD)治疗糖尿病(DM)的作用机制。【方法】 利用TCMSP、ETCM、UniProt、SwissTargetPrediction数据库及文献查阅等查找YCHD的活性成分和相关作用靶点；利用OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank数据库获取DM的疾病靶点。构建YCHD和DM的蛋白互作(PPI)网络图，对关键作用靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。采用AutoDockTool 1.5.7软件进行分子对接，预测活性成分和核心靶点的结合能。将细胞分为对照组(Control)、模型组(Model)及YCHD含药血清低(YCHD-L)、中(YCHD-M)、高(YCHD-H)剂量组，通过体外细胞试验检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶2(COX2)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)p65、白细胞介素-1β(IL1β)、IL6的mRNA表达水平，以及iNOS、COX2、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB p65蛋白表达水平，并对关键通路进行验证。【结果】 共获得YCHD活性成分147个，DM疾病靶点486个，YCHD作用于DM的相关靶点基因57个，其中胰岛素(INS)、IL1β、肿瘤坏死因子(TNF)、B细胞中κ轻型多肽基因增强子的核因子1(NFKB1)、信号传导子和转录活化子1(STAT1)、白蛋白(ALB)、TLR4、IL1A、IL10、IL8等为关键靶基因。根据Counts值筛选出GO前十的条目中包含生物过程1条、细胞组分7条、分子功能2条，主要包括RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、内质网膜、质膜、胞外区、核质、胞质溶胶、细胞质、膜的组成部分、相同蛋白质结合和蛋白质结合。KEGG通路富集分析显示，与NOD样受体、NF-κB、Toll样受体等炎症信号通路密切相关。分子对接结果显示，YCHD的活性有效成分与主要靶点具有良好的结合能力。体外试验结果表明，与对照组相比，模型组细胞TLR4、iNOS、COX2、NF-κB p65、IL1β和IL6 mRNA表达水平及iNOS、COX2、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05)；与模型组相比，YCHD-L、YCHD-M、YCHD-H组细胞iNOS、COX2、IL1β和IL6 mRNA表达水平及iNOS、COX2蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05)，YCHD-M、YCHD-H组细胞TLR4、NF-κB p65 mRNA水平显著降低(P＜0.05)，YCHD-H组细胞MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)。【结论】 YCHD可能通过多成分、多靶点，调控TLR4、NF-κB等多条炎症信号通路，发挥抗DM的作用。以YCHD-H组对炎症信号通路相关指标的抑制最明显。

关键词：糖尿病;茵陈蒿汤;网络药理学;分子对接;试验验证

基金资助：河南省科技攻关项目(242102310540、232102310434);崔应民全国名老中医药专家传承工作室建设项目(国中医药人教函[2022]75号);河南省高校科技创新人才项目(23HASTIT045);河南中医药大学博士科研启动经费(RSBSJJ2019-21、RSBSJJ2019-05)