亚洲象不同组织来源成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第9期北京时间：

作者：李晋达, 彭自伟, Muhammad Ameen Jamal, 角德灵, 魏红江

单位：1. 云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室, 昆明 650201;2. 云南农业大学动物医学院, 昆明 650201;3. 云南农业大学动物科学技术学院, 昆明 650201

摘要：【目的】 建立不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系，并进行冷冻保存和细胞生物学特性研究，为实现濒危动物遗传资源保存和开发利用提供理论依据。【方法】 分别采集6岁龄亚洲象耳缘组织(AE00)、新生亚洲象脐带组织(AE01)及死亡16 h后的4岁龄亚洲象耳缘组织(AE02)样品，分别建立成纤维细胞系并进行传代培养和冷冻保存，通过细胞形态学、增殖能力、衰老及凋亡水平分析不同年龄、不同组织来源成纤维细胞的生物学特性，并进行绿色荧光蛋白(GFP)转染筛选和核型检测，分析亚洲象成纤维细胞的遗传稳定性。【结果】 成功建立了3头亚洲象成纤维细胞系并进行冷冻保存，复苏后细胞均能保持一定水平的活力，经连续传代培养后，细胞形态均呈梭形；AE02成纤维细胞冻存活力、细胞增殖能力均最佳，细胞凋亡率依次为AE01(16.7%)＞AE00(6.4%)＞AE02(3.8%)，细胞衰老率依次为AE00(35.9%)＞AE01(17.2%)＞AE02(7.8%)；AE02细胞经长达19次传代后，细胞染色体数目稳定，AE00进行GFP转染筛选可获得稳定表达GFP的亚洲象成纤维细胞系。【结论】 本研究成功建立了不同年龄、不同组织来源的亚洲象成纤维细胞系，细胞形态均为梭形，不同年龄、不同组织来源的成纤维细胞系增殖能力、细胞衰老及凋亡水平均不同，经连续传代后细胞染色体数目稳定，能实现外源基因的稳定转染和长期筛选，可作为濒危动物遗传资源长期保存和复活个体的重要方法之一。

关键词：亚洲象;成纤维细胞;生物学特性

基金资助：云南省动物基因编辑和体细胞克隆技术创新团队(2018HC016)