黄芪多糖脂质体的制备及其在Caco-2细胞模型的转运特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第10期北京时间：

作者：叶钰滢, 王鸿鑫, 刘栩沂, 韩梓杰, 邓桦, 张楠, 张德显, 杨鸿

单位：佛山大学生命科学与工程学院, 佛山 528231

摘要：【目的】 研究黄芪多糖脂质体(Astragalus polysaccharide liposomes，APSL)制备及其在Caco-2细胞模型中的转运。【方法】 采用薄膜分散法制备APSL，通过透射电镜观察APSL结构，鱼精蛋白法检测APSL的包封率及载药量；建立Caco-2单层细胞模型，通过透射电镜观察其结构，测量细胞电阻值及荧光素钠表观渗透系数(apparent permeability coefficient，Papp)来评价Caco-2细胞模型的致密性和完整性；分别进行肠腔侧(apical side，AP)到基底侧(basolateral side，BL)及BL到AP侧两个转运方向的跨膜转运试验，分析药物浓度及P-糖蛋白(P-gp)的抑制剂维拉帕米溶液(Verapamil，Ver)对转运的影响。【结果】 APSL包封率为71.74%±4.87%，载药量为2.92%，透射电镜下可见球状双层结构，粒径为(126.6±0.283)nm (n=3)，聚合物分散性指数(polymer dispersity index，PDI)为0.190±0.009；透射电镜下观察Caco-2细胞紧密结合，形成微绒毛结构，跨膜电阻值达到650 Ω·cm2，碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)比值达到3.05，荧光素钠Papp为1.96×10-7 cm/s，可满足转运试验的要求。在不同浓度下(75、150、300 μg/mL)，黄芪多糖(APS)的外排率(efflux ratio，ER)均＞1.5，APSL的ER均＜1.5。3个浓度上AP-BL吸收方向上APSL组Papp均极显著高于APS组(P＜0.01)，且ER均低于APS组。加入P-gp蛋白抑制剂后，与APS组相比，APS+Ver组AP-BL方向Papp极显著升高(P＜0.01)，ER降低；而APSL+Ver组两侧的Papp均没有明显变化(P＞0.05)。与APS组ER(3.995)相比，APSL组的ER(1.005)降低。【结论】 APS在体外Caco-2细胞单层模型上的转运较差，为低渗透性化合物，可能存在P-gp蛋白外排，而APSL能够增加APS的转运吸收，提高药物渗透性。

关键词：黄芪多糖脂质体;Caco-2细胞模型;吸收特性

基金资助：广东省高校重点领域专项(2021ZDZX4015)