鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第10期北京时间：

作者：靳换, 孟昭英, 涂敏, 沈佳, 史爱华, 赵蕾, 习硕, 张建伟, 章振华

单位：1. 北京市农林科学院畜牧兽医研究所, 北京 100097;2. 北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206

摘要：【目的】 研究鸡γ-干扰素(chicken interferon γ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用，为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】 通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒，利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用，并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式。【结果】 成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒。将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞，结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用；将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞，结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位。表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362 μmol/L，二者之间有较高的亲和力。分子对接试验结果显示，chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用，Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用。【结论】 本研究结果证明了chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用，且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用。

关键词：鸡γ-干扰素(chIFN-γ);鸡补体受体2(chCR2);相互作用;亲和力

基金资助：国家自然科学基金青年基金(32202793)；北京市农林科学院创新能力建设(KJCX20230424、KJCX20240338)